<?xml version="1.0" encoding="utf-8"?>
<article xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" dtd-version="1.4" article-type="research-article">
  <front>
    <journal-meta>
      <journal-id journal-id-type="issn">2226-5988</journal-id>
      <journal-id journal-id-type="eissn">2686-6749</journal-id>
      <journal-title-group>
        <journal-title xml:lang="ru">Клиническая и экспериментальная морфология</journal-title>
        <journal-title xml:lang="en">Clinical and Experimental Morphology</journal-title>
      </journal-title-group>
      <publisher>
        <publisher-name>ООО "Группа МДВ"</publisher-name>
      </publisher>
    </journal-meta>
    <article-meta>
      <article-id pub-id-type="doi">10.31088/cem2023.12.2.77-88</article-id>
      <title-group>
        <article-title xml:lang="ru">Репаративная регенерация сухожилия под влиянием секретома мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток: экспериментальное исследование</article-title>
        <trans-title-group xml:lang="en">
          <trans-title>Reparative tendon regeneration influenced by multipotent mesenchymal stromal cell secretome: experimental study</trans-title>
        </trans-title-group>
      </title-group>
      <contrib-group>
        <contrib contrib-type="author">
          <name name-style="eastern">
            <surname>Качалин</surname>
            <given-names>Михаил Дмитриевич</given-names>
          </name>
          <name-alternatives>
            <name name-style="eastern" xml:lang="ru">
              <surname>Качалин</surname>
              <given-names>Михаил Дмитриевич</given-names>
            </name>
            <name name-style="western" xml:lang="en">
              <surname>Kachalin</surname>
              <given-names>Mikhail D.</given-names>
            </name>
          </name-alternatives>
          <email>cem.journal@mail.ru</email>
          <contrib-id contrib-id-type="orcid">0000-0001-5942-8771</contrib-id>
          <xref ref-type="aff" rid="aff1"/>
        </contrib>
        <contrib contrib-type="author" corresp="yes">
          <name name-style="eastern">
            <surname>Борхунова</surname>
            <given-names>Елена Николаевна</given-names>
          </name>
          <name-alternatives>
            <name name-style="eastern" xml:lang="ru">
              <surname>Борхунова</surname>
              <given-names>Елена Николаевна</given-names>
            </name>
            <name name-style="western" xml:lang="en">
              <surname>Borkhunova</surname>
              <given-names>Elena N.</given-names>
            </name>
          </name-alternatives>
          <email>borhunova@mail.ru</email>
          <contrib-id contrib-id-type="orcid">0000-0003-2355-8616</contrib-id>
          <xref ref-type="aff" rid="aff1"/>
        </contrib>
        <contrib contrib-type="author">
          <name name-style="eastern">
            <surname>Позябин</surname>
            <given-names>Сергей Владимирович</given-names>
          </name>
          <name-alternatives>
            <name name-style="eastern" xml:lang="ru">
              <surname>Позябин</surname>
              <given-names>Сергей Владимирович</given-names>
            </name>
            <name name-style="western" xml:lang="en">
              <surname>Pozyabin</surname>
              <given-names>Sergey V.</given-names>
            </name>
          </name-alternatives>
          <email>cem.journal@mail.ru</email>
          <contrib-id contrib-id-type="orcid">0000-0002-3825-6082</contrib-id>
          <xref ref-type="aff" rid="aff1"/>
        </contrib>
        <contrib contrib-type="author">
          <name name-style="eastern">
            <surname>Михалева</surname>
            <given-names>Людмила Михайловна</given-names>
          </name>
          <name-alternatives>
            <name name-style="eastern" xml:lang="ru">
              <surname>Михалева</surname>
              <given-names>Людмила Михайловна</given-names>
            </name>
            <name name-style="western" xml:lang="en">
              <surname>Mikhaleva</surname>
              <given-names>Liudmila M.</given-names>
            </name>
          </name-alternatives>
          <email>cem.journal@mail.ru</email>
          <contrib-id contrib-id-type="orcid">0000-0003-2052-914X</contrib-id>
          <xref ref-type="aff" rid="aff2"/>
        </contrib>
        <contrib contrib-type="author">
          <name name-style="eastern">
            <surname>Арешидзе</surname>
            <given-names>Давид Александрович</given-names>
          </name>
          <name-alternatives>
            <name name-style="eastern" xml:lang="ru">
              <surname>Арешидзе</surname>
              <given-names>Давид Александрович</given-names>
            </name>
            <name name-style="western" xml:lang="en">
              <surname>Areshidze</surname>
              <given-names>David A.</given-names>
            </name>
          </name-alternatives>
          <email>cem.journal@mail.ru</email>
          <contrib-id contrib-id-type="orcid">0000-0003-3006-6281</contrib-id>
          <xref ref-type="aff" rid="aff2"/>
        </contrib>
        <contrib contrib-type="author">
          <name name-style="eastern">
            <surname>Козлова</surname>
            <given-names>Мария Александровна</given-names>
          </name>
          <name-alternatives>
            <name name-style="eastern" xml:lang="ru">
              <surname>Козлова</surname>
              <given-names>Мария Александровна</given-names>
            </name>
            <name name-style="western" xml:lang="en">
              <surname>Kozlova</surname>
              <given-names>Maria A.</given-names>
            </name>
          </name-alternatives>
          <email>cem.journal@mail.ru</email>
          <contrib-id contrib-id-type="orcid">0000-0001-6251-2560</contrib-id>
          <xref ref-type="aff" rid="aff2"/>
        </contrib>
        <contrib contrib-type="author">
          <name name-style="eastern">
            <surname>Довгий</surname>
            <given-names>Андрей Игоревич</given-names>
          </name>
          <name-alternatives>
            <name name-style="eastern" xml:lang="ru">
              <surname>Довгий</surname>
              <given-names>Андрей Игоревич</given-names>
            </name>
            <name name-style="western" xml:lang="en">
              <surname>Dovgii</surname>
              <given-names>Andrew I.</given-names>
            </name>
          </name-alternatives>
          <email>cem.journal@mail.ru</email>
          <contrib-id contrib-id-type="orcid">0000-0001-9510-7078</contrib-id>
          <xref ref-type="aff" rid="aff3"/>
        </contrib>
        <aff-alternatives id="aff1">
          <aff>
            <institution xml:lang="ru">ФГБОУ ВО Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии – МВА имени академика К.И. Скрябина (Москва, Россия)</institution>
          </aff>
          <aff>
            <institution xml:lang="en">K.I. Skryabin Moscow State Academy of Veterinary Medicine and Biotechnology (Moscow, Russia)</institution>
          </aff>
        </aff-alternatives>
        <aff-alternatives id="aff2">
          <aff>
            <institution xml:lang="ru">Научно-исследовательский институт морфологии человека имени академика А.П. Авцына ФГБНУ «Российский научный центр хирургии имени академика Б.В. Петровского» (Москва, Россия)</institution>
          </aff>
          <aff>
            <institution xml:lang="en">Avtsyn Research Institute of Human Morphology of FSBSI "Petrovsky National Research Centre of Surgery" (Moscow, Russia)</institution>
          </aff>
        </aff-alternatives>
        <aff-alternatives id="aff3">
          <aff>
            <institution xml:lang="ru">ООО «Т-Хелпер Клеточные Технологии» (Москва, Россия)</institution>
          </aff>
          <aff>
            <institution xml:lang="en">T-Helper Cell Technologies, LLC (Moscow, Russia)</institution>
          </aff>
        </aff-alternatives>
      </contrib-group>
      <pub-date pub-type="epub" iso-8601-date="2023-06-19">
        <day>19</day>
        <month>06</month>
        <year>2023</year>
      </pub-date>
      <pub-date date-type="collection">
        <year>2023</year>
      </pub-date>
      <volume>12</volume>
      <issue>2</issue>
      <fpage>77</fpage>
      <lpage>88</lpage>
      <history>
        <date date-type="received" iso-8601-date="2022-10-06">
          <day>06</day>
          <month>10</month>
          <year>2022</year>
        </date>
        <date date-type="accepted" iso-8601-date="2022-12-12">
          <day>12</day>
          <month>12</month>
          <year>2022</year>
        </date>
        <date date-type="rev-recd" iso-8601-date="2022-11-10">
          <day>10</day>
          <month>11</month>
          <year>2022</year>
        </date>
      </history>
      <abstract xml:lang="ru">
        <p>Введение. Совершенствование методов лечения пациентов с травмами сухожилий является актуальной задачей биологии и медицины. Особенности строения сухожилий обусловливают их заживление с формированием рубцовой ткани при длительном сохранении очагов дистрофии. Это приводит к хронизации и рецидивированию тендинитов. Одним из способов улучшения результатов лечения при тендинитах может стать применение клеточных продуктов, в частности секретома мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (МСК), со стандартизированной концентрацией цитокинов – провоспалительных и противовоспалительных и факторов роста. Однако репаративная регенерация сухожилий под влиянием секретома до сих пор не была изучена. Этой теме и посвящена данная статья. Материалы и методы. Работа проведена на белых беспородных крысах (самцы, масса 120 граммов), которых подразделяли на три группы: группа I сравнения (n=35), группа II – опытная (n=35), группа III – контрольная (интактная, n=25). Животным групп I и II под изофлюрановым наркозом рассекали пяточное сухожилие, накладывали шов, после чего наносили физиологический раствор (группа I) или секретом (группа II). Рану ушивали, повторное введение препаратов проводили через неделю. Животных выводили из эксперимента через 1, 7, 14 и 60 суток. Материал изучали методами световой и трансмиссионной микроскопии. Проводили также микроскопическую морфометрию гистосрезов. Результаты. Показано, что под влиянием секретома МСК репарация сухожилия происходит на фоне менее выраженного воспаления без развития дистрофических изменений. В ткани регенерата пучки коллагеновых волокон расположены преимущественно взаимопараллельно, количество фибробластов немного выше нормы, васкуляризация нормализуется. В контроле на протяжении всего периода исследования сохранялись признаки отека и дистрофии, регенерат представлял собой гиповаскулярную рубцовую ткань, богатую фибробластами. Толщина регенерата сухожилия в опытной группе превышала таковую в контрольной. Заключение. Секретом МСК положительно действует на репарацию сухожилия, а выявленные структурные характеристики регенерата могут свидетельствовать о восстановлении его функциональной полноценности.</p>
      </abstract>
      <trans-abstract xml:lang="en">
        <p>Introduction. Improving treatments for tendon injuries remains a topical issue in biology and medicine. Tendon structure is predisposed to scar formation, with significant regions of dystrophy leading to chronic and recurrent tendinitis. Stem cell regenerative therapy including mesenchymal stromal cell secretome is among promising treatments to improve patient outcomes. Standardized cytokine concentrations can be incorporated into the secretome, which may include both pro- and anti-inflammatory cytokines. This article addresses the use of stromal cell secretome for tendon injury regeneration, which is poorly studied. Materials and methods. The study included 95 white outbred rats (males, weight 120 g), which were divided into three groups: Group I comparison (n=35), Group II experimental (n=35), and Group III control (n=25). Animals in Groups I and II were anesthetized with isoflurane and their calcaneal tendons were dissected and sutured. Animals in Group I were treated with saline solution, whereas Group II received stromal cell secretome. The wounds were subsequently sutured. One week after the manipulation, the animals received the second treatment around the tendon. The animals were withdrawn from the experiment on days 1, 7, 14, and 60. We analyzed the samples using light microscopy with morphometry and transmission electron microscopy.  Results. Treating tendons with stromal cell secretome (Group II) is accompanied by less pronounced inflammation and shows no dystrophic changes. The collagen bundles in the regenerate are parallel to each other, with vasculature being normalized and the number of fibroblasts having a slight increase. The control samples, however, showed inflammation, dystrophy, and scarring with hypovascularization of the regenerate. Moreover, the total fibroblast count in the tissue of the control samples elevated significantly. The regenerate in Group II was slightly thicker than in Group III, while in Group I, the regenerate was thinner than in Group III. Conclusion. Mesenchymal stromal cell secretome greatly contributes to tendon healing. Microscopic tendon regenerate structure is similar to that of the intact sample, suggesting its functional recovery. Keywords: multipotent mesenchymal stromal cells, secretome, cytokines, tendon, trauma, reparative regeneration</p>
      </trans-abstract>
      <kwd-group xml:lang="ru">
        <title>Ключевые слова</title>
        <kwd>мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки</kwd>
        <kwd>секретом</kwd>
        <kwd>цитокины</kwd>
        <kwd>сухожилие</kwd>
        <kwd>травма</kwd>
        <kwd>репаративная регенерация</kwd>
      </kwd-group>
      <kwd-group xml:lang="en">
        <title>Keywords</title>
        <kwd>multipotent mesenchymal stromal cells</kwd>
        <kwd>secretome</kwd>
        <kwd>cytokines</kwd>
        <kwd>tendon</kwd>
        <kwd>trauma</kwd>
        <kwd>reparative regeneration</kwd>
      </kwd-group>
      <funding-group>
        <funding-statement xml:lang="ru">Исследование выполнено в рамках государственного бюджетного финансирования.</funding-statement>
        <funding-statement xml:lang="en">The study was carried out within the framework of state budget funding.</funding-statement>
      </funding-group>
    </article-meta>
  </front>
  <body/>
  <back>
    <ref-list>
      <ref id="ref1">
        <label>1</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Борхунова Е.Н. Морфологические изменения в ткани сухожилия поверхностного сгибателя пальца у лошадей при тендинитах. Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2021;3:6–13. DOI: 10.36871/vet.zoo.bio.202103001. Borkhunova E.N. Morphological changes in the tendon tissue of the superficial flexor of the finger in horses with tendinitis. Veterinary Medicine, Zootechnics and Biotechnology. 2021;3:6–13 (In Russ.). DOI: 10.36871/vet.zoo.bio.202103001.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref2">
        <label>2</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Andarawis-Puri N, Flatow EL, Soslowsky LJ. Tendon basic science: Development, repair, regeneration, and healing. J Orthop Res. 2015;33(6):780–4. DOI: 10.1016/j.surge.2017.04.004.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref3">
        <label>3</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">D’Addona A, Maffulli N, Formisano S, Rosa D. Inflammation in tendinopathy. Surgeon. 2017;15(5): 297–302. DOI: 10.1016/j.surge.2017.04.004.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref4">
        <label>4</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Samora JB, Klinefelter RD. Flexor tendon reconstruction. J Am Acad Orthop Surg. 2016;24(1):28–36. DOI: 10.5435/JAAOS-D-14-00195.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref5">
        <label>5</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Пономаренко Н.С., Куклин И.А., Монастырев В.В., Михайлов И.Н., Рудаков А.Н., Бубнов А.С. и др. Сравнение результатов хирургического лечения пациентов с повреждением пяточного сухожилия при диастазе II и III степени по Myerson с использованием сухожилия подошвенной мышцы. Acta Biomedica Scientifica. 2018;3(3):170–175. DOI: 10.29413/ABS.2018-3.3.32. Ponomarenko NS, Kuklin IA, Monastyrev VV, Mikhaylov IN, Rudakov AN, Bubnov AS et al. Comparison of the results of surgical treatment of patients with Achilles tendon injury at Myerson stage II and III diastasis using plantar muscle flexor tendon. Acta Biomedica Scientifica. 2018;3(3):170–175 (In Russ.). DOI: 10.29413/ABS.2018-3.3.32.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref6">
        <label>6</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Gillespie RJ, Knapik DM, Akkus O. Biologic and synthetic grafts in the reconstruction of large to massive rotator cuff tears. J Am Acad Orthop Surg. 2016;24(12): 823–8. DOI: 10.5435/JAAOS-D-15-00229.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref7">
        <label>7</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Walia B, Huang AH. Tendon stem progenitor cells: Understanding the biology to inform therapeutic strategies for tendon repair. J Orthop Res. 2019;37(6):1270–80. DOI: 10.1002/jor.24156.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref8">
        <label>8</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Costa-Almeida R, Calejo I, Gomes ME. Mesenchymal stem cells empowering tendon regenerative therapies. Int J Mol Sci. 2019;20(12):3002. DOI: 10.3390/ijms20123002.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref9">
        <label>9</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Schneider M, Angele P, Järvinen TAH, Docheva D. Rescue plan for Achilles: Therapeutics steering the fate and functions of stem cells in tendon wound healing. Adv Drug Deliv Rev. 2018;129:352–75. DOI: 10.1016/j.addr.2017.12.016.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref10">
        <label>10</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Al-Ani MKh, Xu K, Sun Y, Pan L, Xu Z, Yang L. Study of bone marrow mesenchymal and tendon-derived stem cells transplantation on the regenerating effect of Achilles tendon ruptures in rats. Stem Cells Int. 2015;2015:984146. DOI: 10.1155/2015/984146.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref11">
        <label>11</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">MacLean S, Khan WS, Malik AA, Snow M, Anand S. Tendon regeneration and repair with stem cells. Stem Cells Int. 2012;2012:316281. DOI: 10.1155/2012/316281.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref12">
        <label>12</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Дремина Н.Н., Трухан И.С., Шурыгина И.А. Клеточные технологии в травматологии: от клетки до клеточной инженерии. Acta Biomedica Scientifica. 2020;5(6):66–76. DOI: 10.29413/ABS.2020-5.6.8. Dremina NN, Trukhan IS, Shurygina IA. Cellular Technologies in Traumatology: from Cells to Tissue Engineering. Acta Biomedica Scientifica. 2020;5(6):66–76 (In Russ.). DOI: 10.29413/ABS.2020-5.6.8.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref13">
        <label>13</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Dyment NA, Hagiwara Y, Matthews BG, Li Y, Kalajzic I, Rowe DW. Lineage tracing of resident tendon progenitor cells during growth and natural healing. PLoS One. 2014;9(4):e96113. DOI: 10.1371/journal.pone.0096113.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref14">
        <label>14</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Ni M, Rui YF, Tan Q, Liu Y, Xu LL, Chan KM et al. Engineered scaffold-free tendon tissue produced by tendon-derived stem cells. Biomaterials. 2013;34(8): 2024–37. DOI: 10.1016/j.biomaterials.2012.11.046.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref15">
        <label>15</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Zhang C, Zhang E, Yang L, Tu W, Lin J, Yuan C et al. Histone deacetylase inhibitor treated cell sheet from mouse tendon stem/progenitor cells promotes tendon repair. Biomaterials. 2018;172:66–82. DOI: 10.1016/j.biomaterials.2018.03.043.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref16">
        <label>16</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">de Lima Santos A, Silva CGD, de Sá Barretto LS, Franciozi CEDS, Tamaoki MJS, de Almeida FG et al. Biomechanical evaluation of tendon regeneration with adipose-derived stem cell. J Orthop Res. 2019;37(6):1281–6. DOI: 10.1002/jor.24182.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref17">
        <label>17</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Augustyniak J, Bertero A, Coccini T, Baderna D, Buzanska L, Caloni F. Organoids are promising tools for species-specific in vitro toxicological studies. J Appl Toxicol. 2019;39(12):1610–22. DOI: 10.1002/jat.3815.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref18">
        <label>18</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Makarevich PI, Efimenko AYu, Tkachuk VA. Biochemical regulation of regenerative processes by growth factors and cytokines: Basic mechanisms and relevance for regenerative medicine. Biochemistry (Moscow). 2020;85(1):11–26. DOI: 10.1134/S0006297920010022.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref19">
        <label>19</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">Позябин С.В., Борхунова Е.Н., Сароян С.В., Комаров С.В., Довгий А.И. Инновационные методы регенеративной медицины при лечении собак и кошек с язвенными кератитами: Учебное пособие. Москва: ЗооВетКнига, 2022. 138 с. DOI: 10.18720/SPBPU/2/z22-8. Pozyabin SV, Borkhunova EN, Saroyan SV, Komarov SV, Dovgiy AI. Innovative methods of regenerative medicine in the treatment of dogs and cats with ulcerative keratitis: Textbook. Moscow: ZooVetKniga, 2022. 138 p. (In Russ.). DOI: 10.18720/SPBPU/2/z22-8.</mixed-citation>
      </ref>
      <ref id="ref20">
        <label>20</label>
        <mixed-citation xml:lang="ru">А.А. Соколов, А.И. Довгий, А.И. Колесникова. Материал стволовых клеток и способ его получения. Патент Российской Федерации 2644650. Заявитель и патентообладатель ООО «Т-Хелпер Клеточные Технологии» – № 2014148251. Заявлено 01.12.2014; опубликовано 27.06.2016. Бюллетень № 18. AA Sokolov, AI Dovgiy, AI Kolesnikova. Stem cell material and method for its production. Patent № 2644650 Russian Federation. Applicant and patent holder LLC “T-Helper Cellular Technologies” – No. 2014148251. Application 12.01.2014; published 06/27/2016. Bulletin No.18.</mixed-citation>
      </ref>
    </ref-list>
  </back>
</article>
